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FITC-PEG-BIOTIN修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的文獻(xiàn)分享

FITC-BIOTIN 是由異硫氰酸熒光素（FITC）和生物素通過共價(jià)鍵連接而成的熒光探針。該分子保留了生物素對(duì)親和素/鏈霉親和素的高親和力，同時(shí)具有 FITC 的典型熒光特性（激發(fā)波長約495 nm，發(fā)射約519 nm）。FITC-BIOTIN 常用于免疫熒光、細(xì)胞成像、親和標(biāo)記、ELISA 檢測及微陣列技術(shù)中。其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，水溶性良好，既具靶向識(shí)別能力又具熒光示蹤功能，是分子探針和納米載體修飾的優(yōu)選標(biāo)記分子。

名稱：FITC-Biotin

中文名稱：熒光素標(biāo)記生物素

英文別名：Fluorescein-Biotin，F(xiàn)luorescein Isothiocyanate-Biotin，Biotin-FITC

性狀：>1K為黃色粉末

結(jié)構(gòu)：

應(yīng)用說明：

1. 免疫分析：FITC-PEG-Biotin可與特異性抗體結(jié)合，用于免疫分析，如酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）、免疫印跡（Western blot）等。通過將FITC-PEG-Biotin標(biāo)記的抗體與目標(biāo)分子結(jié)合，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)特定蛋白質(zhì)或分子的定性和定量檢測。

2. 免疫組織化學(xué)：FITC-PEG-Biotin可以用于免疫組織化學(xué)和免疫染色。將FITC-PEG-Biotin結(jié)合到抗體上，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)組織樣本中特定抗原的熒光染色。這種方法常用于研究組織中蛋白質(zhì)的定位和表達(dá)情況。

3. 熒光顯微鏡成像：FITC-PEG-Biotin的熒光特性使其在熒光顯微鏡成像中具有應(yīng)用。通過將FITC-PEG-Biotin與目標(biāo)分子結(jié)合，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞或組織中特定結(jié)構(gòu)或分子的可視化和定位。這種方法常用于細(xì)胞定位研究和細(xì)胞內(nèi)分子相互作用的觀察。

4. 熒光流式細(xì)胞術(shù)：FITC-PEG-Biotin可用于熒光流式細(xì)胞術(shù)中的細(xì)胞表面標(biāo)記和檢測。將FITC-PEG-Biotin結(jié)合到特定抗體上，可以用于檢測細(xì)胞表面蛋白質(zhì)的表達(dá)水平、細(xì)胞類型的鑒定和細(xì)胞亞群的分析等。

5. 藥物傳遞研究：FITC-PEG-Biotin可作為藥物載體或納米粒子的表面標(biāo)記。通過將FITC-PEG-Biotin結(jié)合到藥物或納米粒子上，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)其在體內(nèi)的分布、代謝和靶向傳遞等方面的研究。

在使用FITC-PEG-Biotin進(jìn)行生物標(biāo)志物檢測和分析時(shí)，需要注意實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、控制反應(yīng)條件和選擇適當(dāng)?shù)臋z測方法。合理選擇濃度和使用條件，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

參考文獻(xiàn)：

來源：

https://link.springer.com/article/10.1186/s13287-023-03446-w

作者：

Yukiya Takayama, Kosuke Kusamori, Yuri Katsurada, Shu Obana, Shoko Itakura & Makiya Nishikawa

標(biāo)題

表面聚乙二醇化高效遞送間充質(zhì)干細(xì)胞/基質(zhì)細(xì)胞至受損肝臟

結(jié)論：

聚乙二醇修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面

為了評(píng)估PEG對(duì)細(xì)胞表面的修飾作用，我們選擇了FITC或Alexa488標(biāo)記的PEG-生物素。FITC-PEG修飾的C3H10T1/2（FITC-PEG-C3H10T1/2）中FITC的熒光強(qiáng)度顯著高于FITC-PEG-生物素處理的未修飾C3H10T1/1（FITC-PEG生物素?+?C3H10T1/2）（圖1A）。此外，共聚焦顯微圖像顯示，F(xiàn)ITC熒光信號(hào)定位在C3H10T1/2細(xì)胞的表面（圖1B）。這些結(jié)果表明，使用ABC法用FITC-PEG-生物素成功修飾了C3H10T1/2細(xì)胞的表面。使用Alexa488 PEG-生物素評(píng)估PEG修飾的保留時(shí)間（圖1C，附加文件1:圖S1）。Alexa488-PEG的熒光強(qiáng)度在24小時(shí)內(nèi)逐漸降低。孵育120小時(shí)后，其熒光強(qiáng)度仍保持在初始值的50%。盡管在隨后的時(shí)間點(diǎn)在C3H10T1/2細(xì)胞內(nèi)檢測到某些熒光信號(hào)，但即使在第5天，這些信號(hào)仍留在細(xì)胞表面。此外，還評(píng)估了PEG修飾對(duì)C3H10T1/2細(xì)胞特性的影響。PEG修飾對(duì)C3H10T1/2細(xì)胞的存活率、增殖和分化的影響可以忽略不計(jì)（圖2）。

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